生物层干涉（Bio-layer Interferometry，BLI）是一种无标记、实时监测生物分子相互作用的光学检测技术，可用于快速评估分子间结合能力并获得亲和力与动力学参数。BLI 通过传感器表面固定配体，实时记录分析物结合与解离过程产生的信号变化，从而计算 kon、koff 及 KD 等关键指标，为抗体筛选、亲和力表征、结合动力学分析及竞争结合研究提供可靠的数据支持。该技术操作灵活、检测效率高，适用于蛋白-蛋白、抗体-抗原、蛋白-多肽/核酸等多种互作体系，能够有效提升研发阶段的筛选效率与决策速度。
• 样品无需修饰
• 保持天然活性
• 降低假阳风险
• 曲线同步输出
• 过程动态可视
• 结果即时判断
• 获取 kon/koff
• 计算亲和力 KD
• 区分强弱结合
• 多通道并行
• 批量样本测试
• 筛选效率更高
• 兼容复杂基质
• 减少样品前处理
• 抗干扰更稳定
• 信号变化清晰
• 拟合模型明确
• 报告易解读
Octet® BLI 系统为蛋白-蛋白和蛋白-小分子互作分析提供了一种无流路、快速且高通量的可靠方法。Octet® BLI 平台可以直接检测特定的蛋白或药物分子，即使是复杂的混合物和未纯化的样品也可以轻松检测，如细胞培养上清液和裂解物。
蛋白库系统性覆盖人源及多物种蛋白靶点（Broad target coverage），涵盖细胞因子、受体、酶类、转录因子及信号通路关键节点。 该规模化蛋白资源可显著降低早期项目的靶点获取门槛（Target accessibility），加速药物研发与机制研究进程。
BLI 支持 96 孔甚至 384 孔板并行检测（High-throughput screening, HTS），可同时分析多个样品或浓度梯度。 在抗体筛选（Antibody screening）、突变体比较（Variant comparison）及候选分子初筛中具有显著效率优势。
BLI 单次检测仅需微量样品（Low sample consumption, μL level），且对样品浓度要求灵活。 非常适合珍贵蛋白、抗体筛选及早期研发阶段样品量有限的项目，显著降低实验成本。
BLI 能测小分子结合吗？会不会信号太弱？
BLI 可以用于部分蛋白–小分子结合检测，但由于小分子分子量小、结合引起的信号变化有限，因此对实验设计要求更高。我们通常会评估目标蛋白固定量、化合物亲和力预期范围以及体系背景噪音，并通过提高分析物浓度梯度、优化传感器类型和减少非特异吸附等方式提升可检测性。对于信号非常弱的项目，我们也会建议结合 MST 或 SPR 等方式进行互补验证。
为什么结合曲线看起来“很漂亮”，但拟合出来的 KD 不稳定？
KD 不稳定常见原因包括：样本浓度不准确、蛋白存在聚集或活性比例不足、固定密度过高导致质量传递限制（mass transport）、以及非特异吸附造成假信号。我们一般会通过优化固定水平、做空白对照与参考扣除、调整浓度梯度范围，并对样本状态进行质量控制（离心澄清、避免冻融）来提升拟合的可靠性，确保参数结果更稳定、可重复。
BLI 能做竞争结合或表位分组（Epitope binning）吗？
可以。BLI 非常常用于竞争结合实验与表位分组，尤其在抗体研发中可以快速判断多个抗体之间是否存在竞争关系，帮助客户完成抗体组合策略选择。
对于需要做双抗设计、鸡尾酒疗法或抗体组合开发的项目，表位分组数据往往具有很高的决策价值。
BLI 的常见问题有哪些？怎么避免数据漂移或假阳性？
BLI 常见的影响因素包括：非特异吸附导致背景升高、样品聚集导致信号异常、缓冲体系不匹配导致基线漂移，以及传感器选择不合适导致结合效率低等。
我们通常会通过优化缓冲体系（盐浓度、添加少量表面活性剂或BSA等）、控制样本状态（避免聚集、过滤离心澄清），并选择匹配的传感器与固定策略来提高数据稳定性，减少漂移与假阳性干扰。
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