服务内容及优势
项目内容
基因克隆:根据客户提供的目的基因序列设计引物,进行PCR扩增并进行目的基因克隆。
CHO细胞培养:采用CHO细胞作为表达宿主,进行细胞培养和扩增。
CHO-GS系统构建:将目的基因插入CHO-GS系统中,通过谷氨酰胺合成酶(GS)基因选择性筛选,构建稳定表达目的蛋白的细胞系。
蛋白表达诱导:通过调节培养基成分和培养条件,实现目的蛋白的高效表达。
蛋白提取与纯化:对表达的蛋白进行细胞破碎和纯化处理,得到高纯度的目的蛋白。
实验步骤
细胞破碎获取包括目的蛋白在内的细胞裂解液。
通过柱层析、凝胶过滤等方法进行蛋白纯化。
在适当的条件下诱导CHO-GS细胞表达目的蛋白。
将目的基因插入CHO-GS表达载体中。
进行CHO细胞转染和筛选,构建稳定表达细胞系。
选择适当的CHO细胞系进行扩增培养。
设计引物并进行PCR扩增。
进行限制性内切酶切割并连接至表达载体。
基因克隆:
CHO细胞培养:
CHO-GS系统构建:
蛋白表达诱导:
蛋白提取与纯化:
交付周期
项目周期一般在4到6周之间,根据蛋白质长度和复杂程度而定。
服务优势
高效率:采用CHO-GS系统进行蛋白表达,实现目的蛋白的高效表达。
高质量:严格控制表达和纯化过程,确保获得高纯度的目的蛋白。
定制化:根据客户需求提供个性化的表达方案和技术支持,满足不同蛋白质的表达需求。
专业团队:拥有经验丰富的专业团队,提供专业的技术支持和服务。